摘 要：本发明属于化学领域，涉及一种大麻二酚(CBD)的纯化方法，特别是涉及一种从工业大麻中提取大麻二酚(CBD)的新方法。其特点是：(1)提取率高，生产步骤简单：采用生物酶解技术和超声波技术将植物细胞壁部分分解，再利用调整机械剪切力和搅拌力，迅速破坏植物细胞组织，使组织细胞内部的化学成分与溶剂充分接触，使有效万分快速溶解转移，在极短时间内达到内外溶解平衡，既大幅度提高植物中生物碱的溶出，又避免高温提取时的杂质溶出，提高生产过程中的滤过速度和纯化效果，简化后续分离纯化步骤。本发明与传统提取方法比较，无有机溶剂残留，因而对环境无污染、成本低。(2)本发明产品纯度高达到95％以上，达到药用要求，或可制备药用其衍生物。
技术要点
1.一种从工业大麻中提取大麻二酚(CBD)的新方法，其特征在于，其步骤如下：
（1）破碎：将大麻花叶破碎，过40-80目筛；
（2）提取：将破碎后的大麻花叶中加入体积为8-12倍量的水，再加入复合纤维素酶，复合纤维素酶与大麻花叶的质量百分比为0.1～0.5％，调节pH值至5～8，在温度20～60℃下酶解12-36小时，再经超声波逆流提取1.5-2h，频率40-50KHz，温度40-60℃，提取两次；
（3）过滤：将提取完全的混浊液过滤，合并2次滤液，得到过滤液；
（4）聚酰胺初步精制：
将所得溶液拌入干燥的聚酰胺粉末，先以水洗去水溶性杂质，再用20％-80％乙醇依次洗脱，收集洗脱液，得提取液；
（5）聚酰胺-大孔树脂联用纯化：
将提取液水浴蒸至近干，加少量乙醇与1/4-1/8，药材用量的聚酰胺粉拌合，水浴挥去溶剂，将聚酰胺放置底部铺有棉花的渗漉筒中，水洗脱至无色，取出铺在填充于3倍至5倍于药材用量的大孔树脂上。湿法装柱，树脂柱的高径比为5∶1-8∶1，流速为3-5BV/h；
（6）乙醇洗脱：
在常温常压下，以1-3BV/h流速，用乙醇液洗脱，洗脱体积为5-7BV；
（7）重结晶：
取纯化的大麻二酚(CBD)按一定的量加甲醇，加热溶解，趁热抽滤，放置过夜，析出结晶，过滤，分离晶体；将剩余物用如上方法加热溶解，重结晶，如此反复两次，得到精制的大麻二酚(CBD)，纯度在95％以上。
本发明方法对上述技术方案进行了下述优化，
步骤（2）中复合纤维素酶的组分及质量比为：纤维素酶40-50％，果胶酶30-40％、半纤维素酶20-30％。
步骤（5）中大孔树脂的型号为AB-8、NKA-II、HPD-100、LX-100型树脂中的一种或几种。
2.根据权利要求1所述的一种从工业大麻中提取大麻二酚(CBD)的新方法，其特征是：所述的步骤（2）中，复合纤维素酶的组分及质量比为：纤维素酶40-50％，果胶酶30-40％、半纤维素酶20-30％。
3.根据权利要求1所述的一种从工业大麻中提取大麻二酚(CBD)的新方法，其特征是：在所述的步骤（5）中，大孔树脂的型号为AB-8、NKA-II、HPD-100、LX-100型树脂中的一种或几种。
技术领域
本发明属于化学领域，涉及一种大麻二酚(CBD)的纯化方法，特别是涉及一种从工业大麻中提取大麻二酚(CBD)的新方法。
背景技术
大麻二酚(简称CBD)是药用植物大麻中的主要化学成分，提取自雌性大麻植株，是雌性大麻植株毛状体内最常见化合物之一，CBD为非活性成分，是大麻中的非成瘾性成分，也就是说CBD不会让你嗨，而THC会。也正是因为THC所导致的大麻精神致幻影响占据了历史舞台，CBD被忽视了数十年，直到2013年，美国有限电视新闻网第一次播出了夏洛特的故事。大麻二酚才又重回人们的视线。大麻二酚(CBD)具有抗痉挛、抗焦虑、抗炎等药理作用。CBD不仅可以作用于多种疑难疾病的治疗，还可以有效地消除四氢大麻酚(THC)对人体产生的致幻作用，被称为“反毒品化合物”(anti-marijuanacompound)。
CBD在医疗领域的应用主要基于其对神经系统的保护作用。它遗传稳定、药动学性质良好，科学家们通过对CBD结构的不断修饰，合成了一系列的CBD类似物，这些类似物具有不同的药理活性，可以作用于不同的疾病。
发明内容
本发明的目的在于克服常规技术提取率相对较低、提取纯度低等缺点，提供一种从工业大麻中提取大麻二酚(CBD)的新方法。其步骤包括：
(1)破碎：将大麻花叶破碎，过40-80目筛；
(2)提取：将破碎后的大麻花叶中加入体积为8-12倍量的水，再加入复合纤维素酶，复合纤维素酶与大麻花叶的质量百分比为0.1～0.5％，调节pH值至5～8，在温度20～60℃下酶解12-36小时，再经超声波逆流提取1.5-2h，频率40-50KHz，温度40-60℃，提取两次；
(3)过滤：将提取完全的混浊液过滤，合并2次滤液，得到过滤液；
(4)聚酰胺初步精制；
将所得溶液拌入干燥的聚酰胺粉末，先以水洗去水溶性杂质，再用20％-80％乙醇依次洗脱，收集洗脱液，得提取液；
(5)聚酰胺-大孔树脂联用纯化：
将提取液水浴蒸至近干，加少量乙醇与1/4-1/8，药材用量的聚酰胺粉拌合，水浴挥去溶剂，将聚酰胺放置底部铺有棉花的渗漉筒中，水洗脱至无色，取出铺在填充于3倍至5倍于药材用量的大孔树脂上。湿法装柱，树脂柱的高径比为5∶1-8∶1，流速为3-5BV/h；
(6)乙醇洗脱：
在常温常压下，以1-3BV/h流速，用乙醇液洗脱，洗脱体积为5-7BV；
(7)重结晶：
取纯化的大麻二酚(CBD)按一定的量加甲醇，加热溶解，趁热抽滤，放置过夜，析出结晶，过滤，分离晶体；将剩余物用如上方法加热溶解，重结晶，如此反复两次，得到精制的大麻二酚(CBD)，纯度在95％以上。
本发明方法对上述技术方案进行了下述优化，
步骤(2)中复合纤维素酶的组分及质量比为：纤维素酶40-50％，果胶酶30-40％、半纤维素酶20-30％。
步骤(4)中大孔树脂的型号为AB-8、NKA-II、HPD-100、LX-100型树脂中的一种或几种。
本发明方法具有以下技术效果：
(1)提取率高，生产步骤简单：采用生物酶解技术和超声波技术将植物细胞壁部分分解，再利用调整机械剪切力和搅拌力，迅速破坏植物细胞组织，使组织细胞内部的化学成分与溶剂充分接触，使有效万分快速溶解转移，在极短时间内达到内外溶解平衡，既大幅度提高植物中生物碱的溶出，又避免高温提取时的杂质溶出，提高生产过程中的滤过速度和纯化效果，简化后续分离纯化步骤。本发明与传统提取方法比较，无有机溶剂残留，因而对环境无污染、成本低。
(2)本发明产品纯度高达到95％以上，达到药用要求，或可制备药用其衍生物。
具体实施方式
下面举例加以说明，这些实施例只是对本发明方法的进一步详细描述，并不意味着对本发明的任何限制。
实施例1
(1)破碎：将大麻花叶破碎，过40目筛；
(2)提取：将破碎后的大麻花叶中加入体积为12倍量的水，再加入40％纤维素酶，30％果胶酶、20％半纤维素酶，与大麻花叶的质量百分比为0.5％，调节pH值至5.5，在温度60℃下酶解12小时，再经超声波逆流提取1.5h，频率50KHz，温度40-60℃，提取两次；
(3)过滤：将提取完全的混浊液过滤，合并2次滤液，得到过滤液；
(4)聚酰胺初步精制：
将所得溶液拌入干燥的聚酰胺粉末，先以水洗去水溶性杂质，再用20％-80％乙醇依次洗脱，收集洗脱液，得提取液；
(5)聚酰胺-大孔树脂联用纯化：
将提取液水浴蒸至近干，加少量乙醇与1/4-1/8，药材用量的聚酰胺粉拌合，水浴挥去溶剂，将聚酰胺放置底部铺有棉花的渗漉筒中，水洗脱至无色，取出铺在填充于3倍至5倍于药材用量的NKA-II大孔树脂上。湿法装柱，树脂柱的高径比为5∶1-8∶1，流速为3-5BV/h；
(6)乙醇洗脱：
在常温常压下，以1-3BV/h流速，用乙醇液洗脱，洗脱体积为5-7BV；
(7)重结晶：
取纯化的大麻二酚(CBD)按一定的量加甲醇，加热溶解，趁热抽滤，放置过夜，析出结晶，过滤，分离晶体；将剩余物用如上方法加热溶解，重结晶，如此反复两次，得到精制的大麻二酚(CBD)，纯度在95.5％。
实施例2
(1)破碎：将大麻花叶破碎，过80目筛；
(2)提取：将破碎后的大麻花叶中加入体积为10倍量的水，再加入40％纤维素酶，30％果胶酶、30％半纤维素酶，与大麻花叶的质量百分比为0.3％，调节pH值至6.8，在温度60℃下酶解24小时，再经超声波逆流提取1.5h，频率50KHz，温度40-60℃，提取两次；
(3)过滤：将提取完全的混浊液过滤，合并2次滤液，得到过滤液；
(4)聚酰胺初步精制：
将所得溶液拌入干燥的聚酰胺粉末，先以水洗去水溶性杂质，再用20％-80％乙醇依次洗脱，收集洗脱液，得提取液；
(5)聚酰胺-大孔树脂联用纯化：
将提取液水浴蒸至近干，加少量乙醇与1/4-1/8，药材用量的聚酰胺粉拌合，水浴挥去溶剂，将聚酰胺放置底部铺有棉花的渗漉筒中，水洗脱至无色，取出铺在填充于3倍至5倍于药材用量的AB-8大孔树脂上。湿法装柱，树脂柱的高径比为5∶1-8∶1，流速为3-5BV/h；
(6)乙醇洗脱：
在常温常压下，以1-3BV/h流速，用乙醇液洗脱，洗脱体积为5-7BV；
(7)重结晶；
取纯化的大麻二酚(CBD)按一定的量加甲醇，加热溶解，趁热抽滤，放置过夜，析出结晶，过滤，分离晶体；将剩余物用如上方法加热溶解，重结晶，如此反复两次，得到精制的大麻二酚(CBD)，纯度在96.3％。
实施例3
(1)破碎：将大麻花叶破碎，过60目筛；
(2)提取：将破碎后的大麻花叶中加入体积为8倍量的水，再加入45％纤维素酶，35％果胶酶、25％半纤维素酶，与大麻花叶的质量百分比为0.1％，调节pH值至7.0，在温度60℃下酶解24小时，再经超声波逆流提取1.5h，频率50KHz，温度40-60℃，提取两次；
(3)过滤：将提取完全的混浊液过滤，合并2次滤液，得到过滤液；
(4)聚酰胺初步精制：
将所得溶液拌入干燥的聚酰胺粉末，先以水洗去水溶性杂质，再用20％-80％乙醇依次洗脱，收集洗脱液，得提取液；
(5)聚酰胺-大孔树脂联用纯化：
将提取液水浴蒸至近干，加少量乙醇与1/4-1/8，药材用量的聚酰胺粉拌合，水浴挥去溶剂，将聚酰胺放置底部铺有棉花的渗漉筒中，水洗脱至无色，取出铺在填充于3倍至5倍于药材用量的LX-100大孔树脂上。湿法装柱，树脂柱的高径比为5∶1-8∶1，流速为3-5BV/h；
(6)乙醇洗脱：
在常温常压下，以1-3BV/h流速，用乙醇液洗脱，洗脱体积为5-7BV；
(7)重结晶：
取纯化的大麻二酚(CBD)按一定的量加甲醇，加热溶解，趁热抽滤，放置过夜，析出结晶，过滤，分离晶体；将剩余物用如上方法加热溶解，重结晶，如此反复两次，得到精制的大麻二酚(CBD)，纯度在97.2％。
摘自国家发明专利，发明人：姚德坤，万莉，姚德利，申请号202010623277.5，申请日2020.06.25
