摘 要： 本发明提供一种复方罗布麻颗粒中罗布麻叶和菊花的薄层鉴别方法，属于中药检测技术领域。本发明的薄层鉴别方法的步骤包括：S1制备供试品溶液、S2制备对照药材溶液、S3制备混合对照品溶液和S4薄层色谱鉴别。本发明通过将环己烷、乙酸乙酯、甲酸按照体积比(6 8)：(4 6)：(0.6 1)混合作为展开剂，点样于同一块薄层板上，以体积浓度为1％的三氯化铝乙醇溶液为显色剂，一次鉴别试验即可同时鉴别复方罗布麻颗粒中的罗布麻叶、菊花两个药味，反映这两个药味的质量信息，斑点清晰，专属性强，耐用性好，鉴别更全面，更有利于控制复方罗布麻颗粒的质量，且减少了薄层鉴别的试验次数，减少试剂用量，节省时间，提高了检验效率。
权利要求书
1.一种复方罗布麻颗粒中罗布麻叶和菊花的薄层鉴别方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、制备供试品溶液：称取复方罗布麻颗粒，研细，加入稀盐酸、乙酸乙酯，超声处理，过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，即得供试品溶液；
S2、制备对照药材溶液：称取罗布麻叶对照药材、菊花对照药材，分别加热，滤过，滤液蒸干后，分别加入稀盐酸和乙酸乙酯，超声处理，过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，即得罗布麻叶对照药材溶液和菊花对照药材溶液；
S3、制备混合对照品溶液：称取槲皮素对照品、山柰素对照品，加乙醇混合，制成槲皮素、山柰素混合对照品溶液；
S4、薄层色谱鉴别：吸取供试品溶液、对照药材溶液和对照品溶液，分别点于薄层板上，加入展开剂，展开，取出，晾干，喷显色剂，加热至斑点显色清晰，检视，在供试品色谱中，在与槲皮素、山柰素对照品色谱和罗布麻叶对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点，在与菊花对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
2.根据权利要求1所述的复方罗布麻颗粒中罗布麻叶和菊花的薄层鉴别方法，其特征在于，所述步骤S1中，称取复方罗布麻颗粒2.5g，研细，加稀盐酸1ml与乙酸乙酯25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
3.根据权利要求1所述的复方罗布麻颗粒中罗布麻叶和菊花的薄层鉴别方法，其特征在于，所述步骤S2中，称取罗布麻叶对照药材、菊花对照药材各1g，分别加热水25ml超声30分钟，滤过，滤液蒸干后，分别加稀盐酸1ml与乙酸乙酯25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，分别作为罗布麻叶对照药材溶液、菊花对照药材溶液。
4.根据权利要求1所述的复方罗布麻颗粒中罗布麻叶和菊花的薄层鉴别方法，其特征在于，所述步骤S3中的混合对照品溶液浓度为每1ml各含0.5mg的槲皮素、山柰素。
5.根据权利要求1所述的复方罗布麻颗粒中罗布麻叶和菊花的薄层鉴别方法，其特征在于，所述步骤S4中吸取供试品溶液的量为5～10μl，对照药材溶液的量为5μl，对照品溶液的量为3μl。
6.根据权利要求1所述的复方罗布麻颗粒中罗布麻叶和菊花的薄层鉴别方法，其特征在于，所述薄层板为同一块硅胶G薄层板。
7.根据权利要求1所述的复方罗布麻颗粒中罗布麻叶和菊花的薄层鉴别方法，其特征在于，所述显色剂为体积浓度为1％的三氯化铝乙醇溶液。
8.根据权利要求1所述的复方罗布麻颗粒中罗布麻叶和菊花的薄层鉴别方法，其特征在于，所述步骤S4中的展开剂由环己烷、乙酸乙酯、甲酸按照体积比(6 8)：(4 6)：(0.6 1)混合而成。
9.根据权利要求8所述的复方罗布麻颗粒中罗布麻叶和菊花的薄层鉴别方法，其特征在于，所述展开剂由环己烷、乙酸乙酯、甲酸按照体积比7：5：0.8混合而成。
10.根据权利要求1所述的复方罗布麻颗粒中罗布麻叶和菊花的薄层鉴别方法，其特征在于，所述步骤S4中的检视为分别在日光和365nm紫外光下检视。
技术领域
本发明涉及中药检测技术领域，具体是涉及一种复方罗布麻颗粒中罗布麻叶和菊花的薄层鉴别方法。
背景技术
中药饮片是中国中药产业不可缺失的部分，是中医临床辨证施治必需的传统武器，其品质直接影响中医临床防病、治病的疗效。复方制剂复方罗布麻颗粒是由罗布麻叶、山楂、菊花三味药材经提取制备而成，具有清热，平肝，安神的功效，用于高血压、神经衰弱引起的头晕，心悸，失眠等症。复方罗布麻颗粒剂经溶解后口服给药，产品具有剂量准确、溶解迅速、便于吸收、起效快、口感好、携带保存方便、服用量小、性质稳定等特点。其中，罗布麻叶为夹竹桃科植物罗布麻的叶，夏季采收，除去杂质，干燥，用于肝火炽盛之头痛眩晕、惊风抽搐，有降低血压的作用。目前对于罗布麻叶配方颗粒的定性研究文献较为缺少，对罗布麻叶配方颗粒质量监控困难。国家药典委员会于2013 08 13公示了“关于2010年版《中国药典》(一部)增补本品种及药品标准提高修订公示”附件24复方罗布麻颗粒质量标准公示稿，对该品种质量标准进行了提高，但至今2020年版《中国药典》仍未收录该品种。该品种2013年药典公示标准中，罗布麻叶薄层鉴别方法包括罗布麻叶对照药材鉴别和槲皮素、山柰素鉴别，菊花鉴别方法包括菊花对照药材、绿原酸鉴别，2味药材3个鉴别方法，难以达到简单、快速鉴别中药制剂中的成分。
中国专利文献CN101269158A公开了一种治疗高血压的药物组合物及制备方法和检测方法，该药物组合物原料药组成为：罗布麻、夏枯草、钩藤、泽泻、珍珠母、牛膝、山楂和菊花。该发明通过对夏枯草、罗布麻的鉴别对产品的质量进行控制，是通过吸取供试品溶液10μl、对照药材溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿、甲醇、水、甲酸按照体积比9∶2.5∶0.1∶0.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铝乙醇溶液，于100℃加热10分钟；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。中国专利文献CN101669977A公开了一种罗布麻叶胶囊的质量检测方法，采用的薄层色谱鉴别条件为：吸取供试品溶液和对照药材溶液各5ul，分别点于同一硅胶薄层板上，以三氯甲烷：甲醇：水：甲酸＝9：2.5：0.1：0.2(体积比)的溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积浓度1％三氯化铝乙醇溶液，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱对应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。这些现有技术中对复方罗布麻颗粒的薄层色谱鉴别方法，均采用单个中药材成分进行鉴别，难以采用相同的方法同时对复方罗布麻颗粒中多个中药成分进行鉴别，因此建立一种快速、简便的鉴别复方罗布麻颗粒中的多味中药成分，对于全面科学鉴定复方罗布麻颗粒的质量有重要意义。
发明内容
针对现有技术中存在的问题，本发明提供了一种复方罗布麻颗粒中罗布麻叶和菊花的薄层鉴别方法，该方法斑点清晰、专属性强、耐用性好；一次鉴别试验即可反映二个药味罗布麻叶和菊花的质量信息，鉴别更全面，更有利于控制复方罗布麻颗粒的质量，且减少了薄层鉴别的试验次数，减少试剂用量，节省时间，提高了检验效率。
为实现上述目的，本发明提供一种复方罗布麻颗粒中罗布麻叶和菊花的薄层鉴别方法，包括如下步骤：
S1、制备供试品溶液：称取复方罗布麻颗粒，研细，加入稀盐酸、乙酸乙酯，超声处理，过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，即得供试品溶液；
S2、制备对照药材溶液：称取罗布麻叶对照药材、菊花对照药材，分别加热，滤过，滤液蒸干后，分别加入稀盐酸和乙酸乙酯，超声处理，过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，即得罗布麻叶对照药材溶液和菊花对照药材溶液；
S3、制备混合对照品溶液：称取槲皮素对照品、山柰素对照品，加乙醇混合，制成槲皮素、山柰素混合对照品溶液；
S4、薄层色谱鉴别：吸取供试品溶液、对照药材溶液和对照品溶液，分别点于薄层板上，加入展开剂，展开，取出，晾干，喷显色剂，加热至斑点显色清晰，检视，在供试品色谱中，在与槲皮素、山柰素对照品色谱和罗布麻叶对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点，在与菊花对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
进一步的，所述复方罗布麻颗粒为无蔗糖的复方罗布麻颗粒。
进一步的，所述步骤S1中，称取复方罗布麻颗粒2.5g，研细，加稀盐酸1ml与乙酸乙酯25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
进一步的，所述步骤S2中，称取罗布麻叶对照药材、菊花对照药材各1g，分别加热水25ml超声30分钟，滤过，滤液蒸干后，分别加稀盐酸1ml与乙酸乙酯25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，分别作为罗布麻叶对照药材溶液、菊花对照药材溶液。
进一步的，所述步骤S3中的混合对照品溶液浓度为每1ml各含0.5mg的槲皮素、山柰素。
进一步的，所述步骤S4中吸取供试品溶液的量为5～10μl，对照药材溶液的量为5μl，对照品溶液的量为3μl。
进一步的，所述薄层板为同一块硅胶G薄层板。
进一步的，所述显色剂为体积浓度为1％的三氯化铝乙醇溶液。
进一步的，所述步骤S4中的展开剂由环己烷、乙酸乙酯、甲酸按照体积比(6 8)：(4 6)：(0.6 1)混合而成。
更进一步的，所述展开剂由环己烷、乙酸乙酯、甲酸按照体积比7：5：0.8混合而成。
进一步的，所述步骤S4中的检视为分别在日光和365nm紫外光下检视。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明提供的复方罗布麻颗粒中罗布麻叶和菊花的薄层鉴别方法，斑点清晰、专属性强、耐用性好，不受薄层板厂家、温度、相对湿度等的影响，无论是在日光下还是365nm紫外光下检视，一次鉴别试验即可反映二个药味罗布麻叶和菊花的质量信息，鉴别更全面，更有利于控制复方罗布麻颗粒的质量，且减少了薄层鉴别的试验次数，减少试剂用量，节省时间，提高了检验效率。
附图说明
图1为实施例1的薄层色谱图；
图2为实施例2的薄层色谱图；
图3为实施例3的薄层色谱图；
图4为不同薄层板考察中，采用Merk硅胶G板作为薄层板进行薄层鉴别得到的薄层色谱图；
图5为不同薄层板考察中，采用烟台银龙硅胶HSG板作为薄层板进行薄层鉴别得到的薄层色谱图；
图6为不同相对湿度考察中，相对湿度为23％时的薄层色谱图；
图7为不同相对湿度考察中，相对湿度为60％时的薄层色谱图；
图8为不同相对湿度考察中，相对湿度为90％时的薄层色谱图；
图9为不同温度考察中，温度为3.8℃时的薄层色谱图；
图10为不同温度考察中，温度为20.2℃时的薄层色谱图；
图11为不同温度考察中，温度为30℃时的薄层色谱图；
图12为对比例1的薄层色谱图；
图13为对比例2的薄层色谱图。
具体实施方式
本发明下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。实施例中所用到的各种常用化学试剂，均为市售产品。除非另有定义，本发明所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不用于限制本发明。
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明了，下面结合具体实施方式，对本发明进一步详细说明。应该理解，这些描述只是示例性的，而并非要限制本发明的范围。此外，在以下说明中，省略了对公知结构和技术的描述，以避免不必要地混淆本发明的概念。
实施例1、本发明的复方罗布麻颗粒的罗布麻叶、菊花薄层鉴别
S1、制备供试品溶液：称取复方罗布麻颗粒(无蔗糖)2.5g，研细，加稀盐酸1ml与乙酸乙酯25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液，重复操作3次，共制备3批复方罗布麻颗粒供试品，编号分别为：KC220905、KC220906、KC221004；
S2、制备对照药材溶液：称取罗布麻叶对照药材、菊花对照药材各1g，分别加热水25ml超声30分钟，滤过，滤液蒸干后，分别加稀盐酸1ml与乙酸乙酯25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，分别作为罗布麻叶对照药材溶液、菊花对照药材溶液；
S3、制备混合对照品溶液：称取槲皮素对照品、山柰素对照品，加乙醇制成每1ml各含0.5mg槲皮素、山柰素的混合溶液，作为槲皮素、山柰素混合对照品溶液；
S4、薄层色谱鉴别：吸取3批复方罗布麻颗粒供试品溶液各5～10μl，对照药材溶液各5μl，对照品溶液各3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷、乙酸乙酯、甲酸按照体积比7：5：0.8为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积浓度为1％的三氯化铝乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别在日光和365nm紫外光下检视，得到的薄层色谱图参见附图1，图1左边图是紫外光下检视得到的薄层色谱图，图1右边图是日光下检视得到的薄层色谱图，无论是日光还是365nm紫外光下，3批复方罗布麻颗粒供试品色谱在与槲皮素、山柰素对照品色谱和罗布麻叶对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点，且罗布麻叶阴性颗粒和空白颗粒无干扰；3批复方罗布麻颗粒供试品色谱在与菊花对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，且菊花阴性颗粒和空白颗粒无干扰。
实施例2、本发明的复方罗布麻颗粒中罗布麻叶和菊花的薄层鉴别方法
S1、制备供试品溶液：称取复方罗布麻颗粒(无蔗糖)2.5g，研细，加稀盐酸1ml与乙酸乙酯25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液，重复操作6次，共制备6批复方罗布麻颗粒供试品，编号分别为：KC220907、KC220908、KC220909、KC220910、KC220911、KC220912；
S2、制备对照药材溶液：称取罗布麻叶对照药材、菊花对照药材各1g，分别加热水25ml超声30分钟，滤过，滤液蒸干后，分别加稀盐酸1ml与乙酸乙酯25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，分别作为罗布麻叶对照药材溶液、菊花对照药材溶液；
S3、制备混合对照品溶液：再取槲皮素对照品、山柰素对照品，加乙醇制成每1ml各含0.5mg槲皮素、山柰素的混合溶液，作为槲皮素、山柰素混合对照品溶液；
S4、薄层色谱鉴别：吸取6批供试品溶液各5～10μl，对照药材溶液各5μl，对照品溶液各3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷、乙酸乙酯甲酸按照体积比7：5：0.8为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积浓度为1％的三氯化铝乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别在日光和365nm紫外光下检视，得到的薄层色谱图参见附图2，图2左边图是紫外光下检视得到的薄层色谱图，图2右边图是日光下检视得到的薄层色谱图，无论是日光还是365nm紫外光下，6批复方罗布麻颗粒供试品色谱在与槲皮素、山柰素对照品色谱和罗布麻叶对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点，且罗布麻叶阴性颗粒和空白颗粒无干扰；6批复方罗布麻颗粒供试品色谱在与菊花对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，且菊花阴性颗粒和空白颗粒无干扰。
实施例3、本发明的复方罗布麻颗粒的罗布麻叶、菊花薄层鉴别
S1、制备供试品溶液：称取复方罗布麻颗粒(无蔗糖)2.5g，研细，加稀盐酸1ml与乙酸乙酯25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液，重复操作6次，共制备6批复方罗布麻颗粒供试品，编号分别为：KC221001、KC221002、KC221003、KC221005、KC221006、KC221007；
S2、制备对照药材溶液：称取罗布麻叶对照药材、菊花对照药材各1g，分别加热水25ml超声30分钟，滤过，滤液蒸干后，分别加稀盐酸1ml与乙酸乙酯25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，分别作为罗布麻叶对照药材溶液、菊花对照药材溶液；
S3、制备混合对照品溶液：称取槲皮素对照品、山柰素对照品，加乙醇制成每1ml各含0.5mg槲皮素、山柰素的混合溶液，作为槲皮素、山柰素混合对照品溶液；
S4、薄层色谱鉴别：吸取6批供试品溶液各5～10μl，对照药材溶液各5μl，对照品溶液各3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷、乙酸乙酯、甲酸按照体积比7：5：0.8为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积浓度为1％的三氯化铝乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别在日光和365nm紫外光下检视，得到的薄层色谱图参见附图3，图3左边图是紫外光下检视得到的薄层色谱图，图3右边图是日光下检视得到的薄层色谱图，无论是日光还是365nm紫外光下，6批复方罗布麻颗粒供试品色谱在与槲皮素、山柰素对照品色谱和罗布麻叶对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点，且罗布麻叶阴性颗粒和空白颗粒无干扰；6批复方罗布麻颗粒供试品色谱在与菊花对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，且菊花阴性颗粒和空白颗粒无干扰。
对比例1
S1、制备供试品溶液：称取复方罗布麻颗粒(无蔗糖)5g，研细，加乙酸乙酯100ml，加热回流1小时，滤过，滤液置分液漏斗中，用水洗涤2次，每次15ml，弃去洗涤液，乙酸乙酯层加无水硫酸钠5g脱水，静置，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液，重复操作3次，得到3批复方罗布麻颗粒溶液，编号为KC220601、KC220701、KC220702；
S2、制备对照药材溶液：称取罗布麻叶对照药材1g，加乙酸乙酯20ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；
S3、水提法制备对照药材溶液：取罗布麻叶对照药材0.5g，加水25ml，加热回流1小时，放冷，滤过，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为罗布麻叶对照药材(水提)；
S4、薄层色谱检测：吸取上述3批供试品溶液各5 10ul，对照药材溶液10ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，将三氯甲烷、甲醇、水和甲酸按照体积比9：2.5：0.1：0.2混合作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积浓度为1％的三氯化铝乙醇溶液，在105℃加热数分钟，置365nm紫外光灯下检视，得到的薄层色谱图参见附图12，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，但罗布麻叶空白颗粒存在阴性干扰，对照药材与样品对应性也稍差。
对比例2
S1、制备供试品溶液：称取复方罗布麻颗粒(无蔗糖)5g，研细，加稀盐酸2ml与乙酸乙酯50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液，编号KC220703；
S2、制备对照药材溶液：取菊花对照药材1g，加稀盐酸1ml与乙酸乙酯50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为对照药材溶液；
S3、制备对照品溶液：另取绿原酸对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；
S4、照薄层色谱试验：吸取供试品溶液及上述对照品和对照药材溶液各0.5 1ul，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯、乙酸乙酯、甲酸、冰醋酸和水按照体积比1：15：1：1：2混合的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，在365nm紫外光下检视，得到的薄层色谱图参见附图13，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，但菊花对照药材与复方罗布麻颗粒供试品对应性差，且有阴性干扰，绿原酸对照品也有阴性干扰。
试验例：方法学考察
1、专属性考察
本发明实施例1 3对15批复方罗布麻颗粒供试品进行了薄层色谱鉴别，得到的薄层色谱图参见附图1 3，无论是日光还是365nm紫外光下，15批复方罗布麻颗粒供试品色谱在与槲皮素、山柰素对照品色谱和罗布麻叶对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点，且罗布麻叶阴性颗粒和空白颗粒无干扰；15批复方罗布麻颗粒供试品色谱在与菊花对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，且菊花阴性颗粒和空白颗粒无干扰，且斑点清晰，说明本发明的薄层方法专属性好，可同时鉴别复方罗布麻颗粒中的罗布麻叶和菊花；而对比例1 2按照2013年《中国药典》公示的标准进行薄层色谱鉴别，薄层色谱图参见附图12 13，发现该标准罗布麻叶对照药材鉴别存在阴性干扰，专属性差，菊花对照药材、绿原酸鉴别也存在阴性干扰，专属性差，该公示标准难以准确地鉴别复方罗布麻颗粒(无蔗糖)的成分。
2、耐用性考察
(1)不同薄层板考察
在相同温度20.8℃和相同相对湿度33％下，使用不同厂家的硅G薄层板对实施例1所得的3批复方罗布麻颗粒供试品溶液KC220905、KC220906、KC221004进行薄层鉴别，所得薄层色谱图参见附图4 5，图4为采用Merk硅胶G板作为薄层板，图5为采用烟台银龙硅胶HSG板作为薄层板，图4、图5中的左边图是紫外光下得到的薄层色谱图、右边图是日光下得到的薄层色谱图，无论是日光还是365nm紫外光下，3批复方罗布麻颗粒供试品色谱在与槲皮素、山柰素对照品色谱和罗布麻叶对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点，且罗布麻叶阴性颗粒和空白颗粒无干扰；3批复方罗布麻颗粒供试品色谱在与菊花对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，且菊花阴性颗粒和空白颗粒无干扰，且斑点清晰明亮，无显著变化，说明本发明提供的薄层鉴别方法适用于不同厂家的硅胶G薄层板，耐用性良好。
(2)不同相对湿度考察
在相同温度5.6℃，在不同相对湿度23％、60％、90％对实施例1所得的3批复方罗布麻颗粒供试品溶液KC220905、KC220906、KC221004进行薄层鉴别，薄层板为Merk硅胶G板，所得薄层色谱图参见附图6 8，图6为相对湿度23％，图7为相对湿度60％，图8为相对湿度90％，图6、图7、图8中左边图是紫外光下得到的薄层色谱图、右边图是日光下得到的薄层色谱图，无论是日光还是365nm紫外光下，3批复方罗布麻颗粒供试品色谱在与槲皮素、山柰素对照品色谱和罗布麻叶对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点，且罗布麻叶阴性颗粒和空白颗粒无干扰；3批复方罗布麻颗粒供试品色谱在与菊花对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，且菊花阴性颗粒和空白颗粒无干扰，斑点清晰明亮，无显著影响，说明本发明的薄层鉴别方法对不同相对湿度的耐用性良好。
(3)不同温度考察
在相同相对湿度32％下，不同温度3.8℃、20.2℃、30℃对实施例1所得的3批复方罗布麻颗粒供试品溶液KC220905、KC220906、KC221004进行罗布麻叶、菊花薄层鉴别，薄层板为Merk硅胶G板，所得薄层色谱图参见附图9 11，图9为温度3.8℃，图10为温度20.2℃，图11为30℃，图9、图10、图11中左边图是紫外光下得到的薄层色谱图、右边图是日光下得到的薄层色谱图，无论是日光还是365nm紫外光下，3批复方罗布麻颗粒供试品色谱在与槲皮素、山柰素对照品色谱和罗布麻叶对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点，且罗布麻叶阴性颗粒和空白颗粒无干扰；3批复方罗布麻颗粒供试品色谱在与菊花对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，且菊花阴性颗粒和空白颗粒无干扰斑点清晰明亮，无显著影响，说明本发明的薄层鉴别方法对不同温度的耐用性良好。
以上实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
摘自国家发明专利，发明人：傅咏梅，卢伟玲，王欢，黄后楷，车轸潮，陈静，梁砚康，邓习燕，申请号：202310163265.2，申请日：2023.02.23
