摘 要：本发明提供一种以工业大麻为原料的大麻二酚的制备方法，属于生物技术领域，具体方案如下：一种以工业大麻为原料的大麻二酚的制备方法，包括以下步骤：步骤一：取工业大麻植株上端三分之一以上的叶片，烘干粉碎得到工业大麻粉末；步骤二：利用无水乙醇和/或甲醇做溶剂，对工业大麻粉末萃取获得CBD粗提液；步骤三：将CBD粗提液浓缩得到CBD浓缩液；步骤四：将CBD浓缩液进行油浴处理，挥发物去除，底物中再加入乙醇和/或甲醇进行复溶，得到纯度为20％-30％的CBD溶液；步骤五：将CBD溶液加入层析柱，用二氯甲烷和/或正己烷洗脱，得到CBD层析液；步骤六：将CBD层析液进行浓缩得到纯度为60％-80％ 的CBD浓缩液。
技术要点
1.一种以工业大麻为原料的大麻二酚的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一：取工业大麻植株上端三分之一以上的叶片，进行烘干、粉碎得到工业大麻粉末；
步骤二：利用无水乙醇和/或甲醇做溶剂，对所述工业大麻粉末进行超声辅助萃取获得CBD粗提液，其中，所述工业大麻粉末与溶剂的料液比为1:4-1:30，超声功率为3000-5000W，萃取温度为80-95℃，萃取时间为2-3h；
步骤三：将所述CBD粗提液放入双效升膜浓缩罐中进行浓缩得到CBD浓缩液，双效升膜浓缩罐的真空度≤0 .075MPa，温度为50-95℃；
步骤四：将所述CBD浓缩液放入旋转蒸发釜中进行油浴处理，将挥发物蒸馏冷凝去除， 底物中再加入乙醇和/或甲醇进行复溶，得到纯度为20％-30％的CBD溶液，其中旋转蒸发釜中真空度为0 .07-0 .08MPa，温度为150-250℃；
步骤五：将所述纯度为20％-30％的CBD溶液加入层析柱，然后用二氯甲烷和/或正己烷洗脱，得到CBD层析液；
步骤六：将所述CBD层析液放入双效升膜浓缩罐进行浓缩得到纯度为60％-80％的CBD 浓缩液，其中双效升膜浓缩罐的真空度0 .075-0 .009MPa，温度为90-95℃。
2.根据权利要求1所述的一种以工业大麻为原料的大麻二酚的制备方法，其特征在于：步骤一中烘干温度为70-95℃，烘干至叶片的水分含量为5％以下。
3.根据权利要求1所述的一种以工业大麻为原料的大麻二酚的制备方法，其特征在于：步骤一中所述工业大麻粉末的粒度为40-200目。
4.根据权利要求1所述的一种以工业大麻为原料的大麻二酚的制备方法，其特征在于：步骤二中采用隧道式超声波与加热联用萃取设备对所述工业大麻粉末进行萃取。
5.根据权利要求1所述的一种以工业大麻为原料的大麻二酚的制备方法，其特征在于：步骤四中旋转蒸发釜的转速为30-50r/min。
6.根据权利要求1所述的一种以工业大麻为原料的大麻二酚的制备方法，其特征在于：步骤四中油浴的时间为30-50min。
7.根据权利要求1所述的一种以工业大麻为原料的大麻二酚的制备方法，其特征在于：步骤五中层析柱的层析介质为对称球形硅胶，硅胶粒度为200-400目。
8.根据权利要求1所述的一种以工业大麻为原料的大麻二酚的制备方法，其特征在于：步骤五中加入层析柱的纯度为20％-30％的CBD溶液的体积为层析柱体积的10-15％。
9.根据权利要求1所述的一种以工业大麻为原料的大麻二酚的制备方法，其特征在于：步骤五中层析柱的径长比为1:6-1:10。
技术领域
本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种以工业大麻为原料的大麻二酚的制备方法。
背景技术
大麻(Cannabis sativa L .)属于桑科大麻属植物，又名汉麻、火麻、黄麻等，大麻中含有一种致幻成瘾的次生代谢产物--四氢大麻酚(tetrahydrocannabinol，THC) ，可作为毒品，曾在很长一段时间内禁种。由于大麻的经济和药用价值极高，大麻在生长期花叶中的
THC含量小于0 .3％的品种被称为工业大麻，不具备毒品利用价值，可以合法进行规模化种植与工业化开发利用。
工业大麻中含有大麻二酚(cannabidiol，CBD)成分，属于非成瘾性成分，大麻二酚具有抗炎、杀菌、阵痛、抗癫痫、抗焦虑、阻断乳腺癌转移以及治疗新生儿缺氧缺血性脑病等药理作用，大麻二酚不仅可以用于多种疑难疾病的治疗，还可以有效的消除四氢大麻酚对人体的致幻作用，被称为“反毒品化合物”，大麻二酚在医疗领域的应用主要基于其对神经系统的保护作用，且遗传稳定、药物动力学性质良好，具有很高的产业开发价值。
大麻二酚(CBD)一般在工业大麻的顶端花叶和花苞中含量较高，工业大麻植株从顶端至根部，CBD的含量成数量级的下降，因此，工厂一般只针对工业大麻的花叶和花苞进行CBD的提取，研发的提取工艺也一般适用于大麻的花叶和花苞；其中工业大麻叶子中CBD 也有1％-3％的含量，这部分含量较低，未被大规模的开发利用，造成极大的浪费。
发明内容
本发明的目的是为了扩大工业大麻植株提取大麻二酚的原料采摘范围，避免大麻植株的浪费，本发明提供一种以工业大麻为原料的大麻二酚的制备方法。
为了实现上述目的，本发明采取如下的技术方案：
一种以工业大麻为原料的大麻二酚的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：取工业大麻植株上端三分之一以上的叶片，进行烘干、粉碎得到工业大麻粉末；
步骤二：利用无水乙醇和/或甲醇做溶剂，对所述工业大麻粉末进行超声辅助萃取获得CBD粗提液，其中，所述工业大麻粉末与溶剂的料液比为1:4-1:30，超声功率为3000-5000W，萃取温度为80-95℃，萃取时间为2-3h；
步骤三：将所述CBD粗提液放入双效升膜浓缩罐中进行浓缩得到CBD浓缩液，双效升膜浓缩罐的真空度≤0 .075MPa，温度为50-95℃；
步骤四：将所述CBD浓缩液放入旋转蒸发釜中进行油浴处理，将挥发物蒸馏冷凝去除，底物中再加入乙醇和/或甲醇进行复溶，得到纯度为20％-30％的CBD溶液，其中旋转蒸发釜中真空度为0.07-0.08MPa，温度为150-250℃；
步骤五：将所述纯度为20％-30％的CBD溶液加入层析柱，然后用二氯甲烷和/或正己烷洗脱，得到CBD层析液；
步骤六：将所述CBD层析液放入双效升膜浓缩罐进行浓缩得到纯度为60％-80％的CBD浓缩液，其中双效升膜浓缩罐的真空度0 .075-0 .009MPa，温度为90-95℃。
进一步的，步骤一中烘干温度为70-95℃，烘干至叶片的水分含量为5％以下。
进一步的，步骤一中所述工业大麻粉末的粒度为40-200目。
优选的，步骤二中采用隧道式超声波与加热联用萃取设备对所述工业大麻粉末进行萃取。
进一步的，步骤四中旋转蒸发釜的转速为30-50r/min。
进一步的，步骤四中油浴的时间为30-50min。
优选的，步骤五中层析柱的层析介质为对称球形硅胶，硅胶粒度为200-400目。
进一步的，步骤五中加入层析柱的纯度为20％-30％的CBD溶液的体积为层析柱体积的10-15％。
进一步的，步骤五中层析柱的径长比为1:6-1:10。
本发明的有益效果：本发明改进了现有技术中大麻二酚的提取工艺，在CBD粗提液进行浓缩后，增加了油浴的步骤，由于油浴的温度比较高，在此步骤中可以除去CBD浓缩液的大部分杂质，得到纯度为20％-30％的CBD溶液，极大的提高了工业大麻叶片中的CBD的提取含量；本发明适用于工业大麻植株上端1/3的叶片，且较多级层析制备CBD，工艺简单、降低成本，节约时间，提取纯度高，提高产品质量，增加了产品得率，并且有效避免了资源的浪费。
具体实施方式
下面通过具体实施方式对本发明做进一步的说明，但并不局限于此，凡是对本发明技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的范围，均应涵盖在本发明的保护范围中。
具体实施方式一
一种以工业大麻为原料的大麻二酚的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：取工业大麻植株上端三分之一以上的叶片，进行烘干、粉碎得到粒度为40目的工业大麻粉末；其中烘干温度为70℃，烘干至叶片的水分含量为5％以下；
步骤二：将工业大麻粉末放入隧道式超声波与加热联用萃取设备中，利用无水乙醇做溶剂，进行萃取获得CBD粗提液，其中，所述工业大麻粉末与溶剂的料液比为1:4，超声功率为3000W，萃取温度为80℃，萃取时间为3h；
步骤三：将所述CBD粗提液放入双效升膜浓缩罐中浓缩至CBD粗提液体积的1/16， 得到CBD浓缩液，双效升膜浓缩罐的真空度≤0 .075MPa，温度为50℃；
步骤四：将所述CBD浓缩液放入旋转蒸发釜中进行油浴处理，将挥发物蒸馏冷凝去除，底物中再加入乙醇进行复溶，得到纯度为20％-30％的CBD溶液，其中旋转蒸发釜中真空度为0 .07MPa，温度为150℃，旋转蒸发釜的转速为30r/min，油浴的时间为50min；
步骤五：将所述纯度为20％-30％的CBD溶液加入层析柱，然后用二氯甲烷洗脱，得到CBD层析液；其中，层析柱的层析介质为对称球形硅胶，硅胶粒度为200目，层析柱的径长比为1:6，加入层析柱的纯度为20％-30％的CBD溶液的体积为层析柱体积的10％；
步骤六：将所述CBD层析液放入双效升膜浓缩罐中浓缩至CBD粗提液体积的1/6，得到纯度为60％-80％的CBD浓缩液，其中双效升膜浓缩罐的真空度为0 .075MPa，温度为90℃。
具体实施方式二
一种以工业大麻为原料的大麻二酚的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：取工业大麻植株上端三分之一以上的叶片，进行烘干、粉碎得到粒度为200目的工业大麻粉末；其中烘干温度为95℃，烘干至叶片的水分含量为5％以下；
步骤二：将工业大麻粉末放入隧道式超声波与加热联用萃取设备中，利用甲醇做溶剂，进行萃取获得CBD粗提液，其中，所述工业大麻粉末与溶剂的料液比为1:30，超声功率为5000W，萃取温度为95℃，萃取时间为2h；
步骤三：将所述CBD粗提液放入双效升膜浓缩罐中浓缩至CBD粗提液体积的1/20， 得到CBD浓缩液，双效升膜浓缩罐的真空度≤0 .075MPa，温度为95℃；
步骤四：将所述CBD浓缩液放入旋转蒸发釜中进行油浴处理，将挥发物蒸馏冷凝去除，底物中再加入甲醇进行复溶，得到纯度为20％-30％的CBD溶液，其中旋转蒸发釜中真空度为0.08MPa，温度为250℃，旋转蒸发釜的转速为50r/min，油浴的时间为30min；
步骤五：将所述纯度为20％-30％的CBD溶液加入层析柱，然后用正己烷洗脱，得到CBD层析液；其中，层析柱的层析介质为对称球形硅胶，硅胶粒度为400目，层析柱的径长比为1:10，加入层析柱的纯度为20％-30％的CBD溶液的体积为层析柱体积的15％；
步骤六：将所述CBD层析液放入双效升膜浓缩罐中浓缩至CBD粗提液体积的1/10，得到纯度为60％-80％的CBD浓缩液，其中双效升膜浓缩罐的真空度0 .009MPa，温度为95℃。
具体实施方式三
一种以工业大麻为原料的大麻二酚的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：取工业大麻植株上端三分之一以上的叶片，进行烘干、粉碎得到粒度为100目的工业大麻粉末；其中烘干温度为80℃，烘干至叶片的水分含量为5％以下；
步骤二：将工业大麻粉末放入隧道式超声波与加热联用萃取设备中，利用任意比例混合的无水乙醇和甲醇做溶剂，进行萃取获得CBD粗提液，其中，所述工业大麻粉末与溶剂的料液比为1:10，超声功率为4000W，萃取温度为85℃，萃取时间为2 .5h；
步骤三：将所述CBD粗提液放入双效升膜浓缩罐中浓缩至CBD粗提液体积的1/18，得到CBD浓缩液，双效升膜浓缩罐的真空度≤0 .075MPa，温度为70℃；
步骤四：将所述CBD浓缩液放入旋转蒸发釜中进行油浴处理，将挥发物蒸馏冷凝去除，底物中再加入任意比例混合的乙醇和甲醇进行复溶，得到纯度为20％-30％的CBD溶液，其中旋转蒸发釜中真空度为0 .07MPa，温度为220℃，旋转蒸发釜的转速为40r/min，油浴的时间为40min；
步骤五：将所述纯度为20％-30％的CBD溶液加入层析柱，然后用二氯甲烷和正己烷洗脱，得到CBD层析液；其中，层析柱的层析介质为对称球形硅胶，硅胶粒度为350目，层析柱的径长比为1:8，加入层析柱的纯度为20％-30％的CBD溶液的体积为层析柱体积的12％；
步骤六：将所述CBD层析液放入双效升膜浓缩罐中浓缩至CBD粗提液体积的1/9，得到纯度为60％-80％的CBD浓缩液，其中双效升膜浓缩罐的真空度0 .03MPa，温度为92℃。
具体实施方式四
一种以工业大麻为原料的大麻二酚的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：取工业大麻植株上端三分之一以上的叶片，进行烘干、粉碎得到粒度为150目的工业大麻粉末；其中烘干温度为90℃，烘干至叶片的水分含量为5％以下；
步骤二：将工业大麻粉末放入隧道式超声波与加热联用萃取设备中，利用无水乙醇做溶剂，进行萃取获得CBD粗提液，其中，所述工业大麻粉末与溶剂的料液比为1:20，超声功率为4500W，萃取温度为90℃，萃取时间为2.5h；
步骤三：将所述CBD粗提液放入双效升膜浓缩罐中浓缩至CBD粗提液体积的1/19，得到CBD浓缩液，双效升膜浓缩罐的真空度≤0 .075MPa，温度为80℃；
步骤四：将所述CBD浓缩液放入旋转蒸发釜中进行油浴处理，将挥发物蒸馏冷凝去除，底物中再加入甲醇进行复溶，得到纯度为20％-30％的CBD溶液，其中旋转蒸发釜中真空度为0.08MPa，温度为200℃，旋转蒸发釜的转速为45r/min，油浴的时间为45min；
步骤五：将所述纯度为20％-30％的CBD溶液加入层析柱，然后用二氯甲烷和正己烷洗脱，得到CBD层析液；其中，层析柱的层析介质为对称球形硅胶，硅胶粒度为300目，层析柱的径长比为1:7，加入层析柱的纯度为20％-30％的CBD溶液的体积为层析柱体积的14％；
步骤六：将所述CBD层析液放入双效升膜浓缩罐中浓缩至CBD粗提液体积的1/8，得到纯度为60％-80％的CBD浓缩液，其中双效升膜浓缩罐的真空度0 .05MPa，温度为93℃。
摘自国家发明专利，发明人：王振宇,张华,张胜宇,辛超,王佳慧,申请号：201910780726.4,申请日期：2019.08.22
