8 检验规则
8.1 检验分类
产品交货时进行的检验。
新产品鉴定或国家质检机构质量监督检验。
8.2 检验项目
型式检验的检验项目按
8.3 判定规则
a) 检验结果符合
b) 杂菌率不符合指标,但液体样品杂菌率不超过10%,固体样品杂菌率不超过20%,在10-6根瘤菌平板上无霉菌出现,其他各项指标符合,也可判为合格产品;
c) 在pH值、水分、吸附剂颗粒细度、外观和气味等次要检测项目中,有两项不符合技术指标,但活菌数及杂菌率符合指标要求,也可判为合格产品。
a) 根瘤菌活菌数不符合技术指标,判为不合格产品;
b) 液体样品杂菌率超过10%,固体样品杂菌率超过20%,判为不合格品;
c) 在10-6根瘤菌培养基平板上出现霉菌判为不合格产品;
d) 小粒种子用的根瘤菌肥,吸附剂通过孔径
9 包装、标识、运输和贮存
9.1 包装
液体肥料小包装用塑料瓶或玻璃瓶,大包装用塑料桶。固体肥料用不透明聚乙烯塑料袋包装。
外包装采用纸箱,纸箱质量应符合GB/T 6543要求。箱外用尼龙打包带加固。
9.2 标识
在包装箱(袋) 上印有产品名称、商标、标准编号、肥料登记证号、生产单位、厂址、生产日期、批号和净重,并印有防晒、防潮、防冻等标记,若有必要还要加印易碎、防倒置等标记。内包装上有产品名称、商标、标准编号、肥料登记证号、有效菌含量、生产日期、有效期、产品性能、使用说明书及生产单位、厂址等。
根瘤菌肥料的产品名称与产品中根瘤菌的名称应符合。例如:用大豆根瘤菌生产的肥料,其产品名称为大豆根瘤菌肥料。
在产品性能中应标明产品可接种的豆科寄主名称。
9.3 运输和贮存
根瘤菌肥料的运输和贮存按NY411-2000中9.3和9.4执行。
附录A
(标准的附录)
革兰氏染色
革兰氏染色阳性细菌与革兰氏染色阴性细菌的细胞壁,对结晶紫-碘复合物的渗透性不同,而形成染色阳性或染色阴性反应。
A1 染剂
A1.1 结晶紫液(赫克尔Hucker氏配方)
甲液:结晶紫
乙醇(95%) 20mL
乙液:草酸镀
蒸馏水 80mL
甲、乙液相混合,静置48h后使用。此染液较稳定,在不透气的暗色瓶中可储存数月。A1.2 卢哥(Lugol)氏碘液
碘(I)片 Ig
碘化钾(KI)
蒸馏水 300mL
先用少量(3~5mL)蒸馆水溶解碘化钾,再投入碘片,待碘全溶后,加水稀释。此染液稳定,在不透气的暗色瓶中可存数月。
A1.3 脱色液(95%的乙醇)
A1.4 复染液(0.5%的番红水溶液)
取
A2 涂片
A2.1 在无油迹的干净载片上用蜡笔划好格,片端注明日期、片号。
A2.2 在载片上的每个格内滴一小滴无菌水或蒸馏水。用接种环挑取少许菌苔,于水滴边缘轻轻涂几下。
A2.3 自然风干或微热促其快干,干后在火焰上通过1~2次,以固定涂片。
A3 染色步骤
3.1 滴加结晶紫液,覆盖约1min。
A3.2 用水冲净结晶紫液。
A3.3 滴加碘液冲去残水。并覆盖约1min。
3.4 用水冲去碘液,将片上水甩净或用滤纸吸干。
3.5 将片倾斜,并衬以白背景,流滴95%酒精液约20~30s。立即用水冲净酒精。
3.6 用番红液染1~2(或更长)min。
A3.7 用水洗净番红,用滤纸吸干表面水或风干,备镜检。
A4 观察结果
用显微镜油镜直接在载玻片上检查。红色为革兰氏染色阴性,蓝紫色为革兰氏染色阳性。
A5 注意事项
A5.1 革兰氏染色的配方很多,但染色成功与否,很大程度上取决于经验。在没有把握时,最好在同一载玻片上,用大肠杆菌和金黄色葡萄球菌作为革兰氏染色阴性和阳性的对照菌。
A5.2 革兰氏染色操作中,以涂片和脱色两步最为重要。涂片切不可过于浓厚。对于易于乳化的细菌,将沾有菌苔的接种环在水滴边缘轻轻涂一二下即可。镜检时,以分散开的细菌的革兰氏染色反应为准。过于密集的细菌,常常呈假阳性。对纯细菌的涂片,以95%乙醇脱色易于掌握。乙醇中含有更多的水分,则脱色力加强,易形成假阴性。要尽量减少载玻片上的残水。只是甩净或用乙醇冲去残水,以脱色20s为宜,用滤纸吸净残水,可用乙醇脱色近30s。A5.3 用火焰固定时不可过热,以载玻片不烫手为宜。过热会使染色反应不正确。实际上对斜面纯细菌涂片,风干后不经火焰固定即可染色。
A5.4 建议复染液用0.5%番红液。其他复染液,如稀释的石碳酸复红液等,可根据具体情况选用。
A5.5 由于龙胆紫不是单一成分的染料,与结晶紫不同,按前述配方染色后,常常不易脱色,出现假阳性。遇到这种情况可将染色剂稀释后使用。试用的龙胆紫稀释成十分之一的浓度可以使用,但颜色仍然不如结晶紫。
A5.6 对一般容易生长的异养细菌,以检查培养18~24h的菌为宜。革兰氏染色阴性细菌的染色反应稳定,不易受菌龄的影响。革兰氏染色阳性细菌的染色反应,有的受菌龄的影响:较幼的细胞,培养18~24h或更短的,呈阳性反应,较老的细胞,培养24h或48h以上的细胞,则部分或全部细胞转变为阴性反应。区分革兰氏染色反应时应注意。