作者:   来源:中国化肥资讯网   发布时间:2008-09-10   Tag:   点击:
根瘤菌肥料(NY 410-2000)标准(三)

  

检验规则

8.1 检验分类

8.1.1 产品出厂检验

产品交货时进行的检验。

8.1.2 产品型式检验

新产品鉴定或国家质检机构质量监督检验。

8.2 检验项目

型式检验的检验项目按5.2.15.2.2要求进行。出厂检验不检有效期。

8.3 判定规则

8.3.1 合格产品:

a)  检验结果符合5.2.1(5.2.2)所规定的技术指标的产品为合格产品;

b)  杂菌率不符合指标,但液体样品杂菌率不超过10%,固体样品杂菌率不超过20%,在10-6根瘤菌平板上无霉菌出现,其他各项指标符合,也可判为合格产品;

c) pH值、水分、吸附剂颗粒细度、外观和气味等次要检测项目中,有两项不符合技术指标,但活菌数及杂菌率符合指标要求,也可判为合格产品。

8.3.2 不合格产品:

a)  根瘤菌活菌数不符合技术指标,判为不合格产品;

b)  液体样品杂菌率超过10%,固体样品杂菌率超过20%,判为不合格品;

c)   10-6根瘤菌培养基平板上出现霉菌判为不合格产品;

d)  小粒种子用的根瘤菌肥,吸附剂通过孔径0.15mm标准筛的筛余物≥30%,判为不合格产品。

8.3.3 含有芽胞杆菌或假单胞杆菌等促生细菌的根瘤菌肥料产品检测时,芽胞杆菌和假单胞杆菌的判断按产品企业标准提供的依据进行。

包装、标识、运输和贮存

9.1 包装

9.1.1 内包装

液体肥料小包装用塑料瓶或玻璃瓶,大包装用塑料桶。固体肥料用不透明聚乙烯塑料袋包装。

9.1.2 外包装

外包装采用纸箱,纸箱质量应符合GB/T 6543要求。箱外用尼龙打包带加固。

9.1.3 每箱()产品中附有产品合格证和使用说明书,在使用说明中标明使用方法、用量及注意事项。

9.2 标识

在包装箱() 上印有产品名称、商标、标准编号、肥料登记证号、生产单位、厂址、生产日期、批号和净重,并印有防晒、防潮、防冻等标记,若有必要还要加印易碎、防倒置等标记。内包装上有产品名称、商标、标准编号、肥料登记证号、有效菌含量、生产日期、有效期、产品性能、使用说明书及生产单位、厂址等。

9.2.1 产品名称

根瘤菌肥料的产品名称与产品中根瘤菌的名称应符合。例如:用大豆根瘤菌生产的肥料,其产品名称为大豆根瘤菌肥料。

9.2.2 产品性能

在产品性能中应标明产品可接种的豆科寄主名称。

9.3 运输和贮存

根瘤菌肥料的运输和贮存按NY411-20009.39.4执行。

附录A

(标准的附录)

革兰氏染色

革兰氏染色阳性细菌与革兰氏染色阴性细菌的细胞壁,对结晶紫-碘复合物的渗透性不同,而形成染色阳性或染色阴性反应。

A1  染剂

A1.1 结晶紫液(赫克尔Hucker氏配方)

甲液:结晶紫          2g

乙醇(95%)     20mL

乙液:草酸镀        0.8g

蒸馏水        80mL

甲、乙液相混合,静置48h后使用。此染液较稳定,在不透气的暗色瓶中可储存数月。A1.2 卢哥(Lugol)氏碘液

(I)               Ig

碘化钾(KI)            2g

蒸馏水              300mL

先用少量(3~5mL)蒸馆水溶解碘化钾,再投入碘片,待碘全溶后,加水稀释。此染液稳定,在不透气的暗色瓶中可存数月。

A1.3 脱色液(95%的乙醇)

A1.4 复染液(0.5%的番红水溶液)

2.5g番红,溶于loomL无水酒精中。取番红酒精溶液20mL,加入80mL蒸馏水,即成0.5%的番红水溶液。

A2  涂片

A2.1 在无油迹的干净载片上用蜡笔划好格,片端注明日期、片号。

A2.2 在载片上的每个格内滴一小滴无菌水或蒸馏水。用接种环挑取少许菌苔,于水滴边缘轻轻涂几下。

A2.3 自然风干或微热促其快干,干后在火焰上通过1~2次,以固定涂片。

A3  染色步骤

3.1 滴加结晶紫液,覆盖约1min

A3.2 用水冲净结晶紫液。

A3.3 滴加碘液冲去残水。并覆盖约1min

3.4 用水冲去碘液,将片上水甩净或用滤纸吸干。

3.5 将片倾斜,并衬以白背景,流滴95%酒精液约20~30s。立即用水冲净酒精。

3.6 用番红液染1~2(或更长)min

A3.7 用水洗净番红,用滤纸吸干表面水或风干,备镜检。

A4  观察结果

用显微镜油镜直接在载玻片上检查。红色为革兰氏染色阴性,蓝紫色为革兰氏染色阳性。

A5  注意事项

A5.1 革兰氏染色的配方很多,但染色成功与否,很大程度上取决于经验。在没有把握时,最好在同一载玻片上,用大肠杆菌和金黄色葡萄球菌作为革兰氏染色阴性和阳性的对照菌。

A5.2 革兰氏染色操作中,以涂片和脱色两步最为重要。涂片切不可过于浓厚。对于易于乳化的细菌,将沾有菌苔的接种环在水滴边缘轻轻涂一二下即可。镜检时,以分散开的细菌的革兰氏染色反应为准。过于密集的细菌,常常呈假阳性。对纯细菌的涂片,以95%乙醇脱色易于掌握。乙醇中含有更多的水分,则脱色力加强,易形成假阴性。要尽量减少载玻片上的残水。只是甩净或用乙醇冲去残水,以脱色20s为宜,用滤纸吸净残水,可用乙醇脱色近30sA5.3 用火焰固定时不可过热,以载玻片不烫手为宜。过热会使染色反应不正确。实际上对斜面纯细菌涂片,风干后不经火焰固定即可染色。

A5.4 建议复染液用0.5%番红液。其他复染液,如稀释的石碳酸复红液等,可根据具体情况选用。

A5.5 由于龙胆紫不是单一成分的染料,与结晶紫不同,按前述配方染色后,常常不易脱色,出现假阳性。遇到这种情况可将染色剂稀释后使用。试用的龙胆紫稀释成十分之一的浓度可以使用,但颜色仍然不如结晶紫。

A5.6 对一般容易生长的异养细菌,以检查培养18~24h的菌为宜。革兰氏染色阴性细菌的染色反应稳定,不易受菌龄的影响。革兰氏染色阳性细菌的染色反应,有的受菌龄的影响:较幼的细胞,培养18~24h或更短的,呈阳性反应,较老的细胞,培养24h48h以上的细胞,则部分或全部细胞转变为阴性反应。区分革兰氏染色反应时应注意。


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